Анализ мокроты относят к дополнительным методам обследования при заболеваниях дыхательной системы. Особое значение имеет процедура при подозрении на туберкулез. В этом случае для установления диагноза необходимо провести трехкратный сбор и исследование мокроты на наличие микобактерий туберкулеза.
Цель проведения
Важно различать клинический анализ мокроты и исследование её на наличие микобактерий туберкулеза (КУМ, БК).
В первом случае оцениваются общие характеристики бронхиального секрета: макроскопические (цвет, запах, консистенция, характер, количество) и микроскопические параметры, наличие специфических включений (спирали Куршмана, пробки Дитриха, фибринозные свертки).
Анализ мокроты на БК (бактерии Коха) – это метод диагностики, направленный на выявление микобактерий туберкулеза в выделениях из дыхательных путей.
Данное исследование применяют для:
- диагностики легочного туберкулеза;
- определения формы заболевания (с бактериовыделением или без);
- динамического наблюдения в процессе лечения;
- контроля излеченности.
Информативность анализа зависит от метода обследования. При прямой бактериоскопии возможно не только выявить возбудителя, но и определить его примерную концентрацию. Однако исследование будет результативно только при достаточном количестве жизнеспособных микобактерий.
При проведении культурального исследования (посева) можно обнаружить даже скудное количество микроорганизмов. Также возможно детально изучить БК и определить их чувствительность к лекарственным препаратам.
Подготовка пациента
Важнейшим аспектом обследования на наличие микобактерий туберкулеза является правильная подготовка пациента к сбору мокроты:
- Накануне исследования рекомендуется принимать больше жидкости.
- Если мокрота отходит с трудом, следует назначить отхаркивающие препараты.
- Перед самой процедурой важно позаботиться о гигиене ротовой полости.
- Необходимо вычистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой.
Сбор мокроты проводится в утреннее время, натощак. Пациент находится в специально оборудованном помещении. Для сбора выделений лаборатория выдает специальный стерильный контейнер. На нем указываются данные пациента и личный номер образца. Также заполняется направление на исследование.
Читайте также:
До момента доставки в лабораторию контейнер хранится в холодильной установке.
Правила сбора
Процедура проводится в присутствии медработника. При отсутствии контроля пациенту сложно правильно собрать мокроту для анализа на микобактерии. Без наблюдения исследуемый может также пренебречь санитарными нормами.
Не следует забывать, что во время кашля риск инфицирования посторонних лиц возрастает. Поэтому в процессе сбора мокроты на БК необходимо соблюдать санитарно-гигиенические правила и нормы, а также четко следовать алгоритму действий.
Пациент, прикрыв рот салфеткой, совершает три глубоких вдоха. После этого, на выдохе, необходимо откашлять мокроту. Контейнер для сбора материала должен находиться у нижней губы. После необходимо сплюнуть мокроту в емкость, при этом нельзя касаться ее краев. По завершении процедуры крышка контейнера плотно закрывается. Наружный край тары обрабатывается дезинфицирующим раствором.
После всех манипуляций емкость с образцом помещается в холодильник или в особый бокс, в котором транспортируется в лабораторию.
Важно помнить, что исследованию подлежит именно патологическое отделяемое дыхательных путей, а не слюна. Поэтому, если у пациента нет кашля, правильно будет сдать анализ мокроты на туберкулез после ряда мер. Применяются раздражающие аэрозоли, провоцирующие отделение бронхиального секрета. При отсутствии эффекта исследуют промывные воды желудка и бронхов.
Методы исследования посева на микобактерии
Исследование мокроты на наличие микобактерий туберкулеза (БК) производится при помощи:
- прямой микроскопии;
- люминесцентной бактериоскопии;
- посева на питательные среды;
- биологического метода (утратил свою актуальность);
- ИФА;
- ПЦР;
- BACTEC MGIT.
Бактериоскопический метод диагностики (прямая микроскопия) заключается в исследовании мокроты после ее окраски по Цилю-Нильсену. В мазке микобактерии визуализируются в виде красноватых палочек.
Читайте также:
К преимуществам метода относят быстроту и простоту процедуры. Однако информативность ее невысока. Для улучшения качества обследования используют методики обогащения материала (флотация, седиментация) и окраску люминесцентными красителями.
Люминесцентная бактериоскопия использует свойство различного свечения объектов в ультрафиолетовом спектре. В результате МТБ визуализируются в виде золотистых палочек на темном фоне. По данным исследователей, информативность бактериоскопии в этом варианте увеличивается на 30%.
Метод флотации позволяет выявить микобактерии даже при их незначительном содержании. К свежесобранной мокроте добавляют водную суспензию лёгких углеводородов. Затем пробирку встряхивают, после чего раствор оставляют на некоторое время для отстаивания. Позднее на поверхности раствора образуется флотационное кольцо, которое в большом количестве содержит микобактерии. Этот материал используют для приготовления мазков.
При седиментации осаждение микобактерий происходит в результате добавления хлороформа с последующим центрифугированием. Из полученного осадка готовят мазок, который красят и изучают под микроскопом.
Бактериологический (культуральный) метод основан на выращивании колоний возбудителя на питательной среде. Преимущество такого исследования мокроты на кислотоустойчивые микобактерии (КУМ) заключается в высокой чувствительности метода. Для обнаружения необходимо от 20 до 100 жизнеспособных клеток в 1 мл. Также возможно детально изучить возбудителя: определить его типовую принадлежность и лекарственную устойчивость. К недостаткам метода относят длительность обследования и его высокую стоимость.
Также мокроту могут исследовать при помощи ПЦР (полимеразной цепной реакции). В этом случае в биологическом материале осуществляется поиск и верификация ДНК возбудителя.
При проведении ИФА (иммуноферментного анализа) в биологическом материале обнаруживаются антигены и антитела. Недостатком метода считается низкая специфичность ввиду большого количества перекрестных реакций.
Помимо классических методов, в практике используются системы микробиологического мониторинга (BACTEC MGIT). Однако ввиду высокой себестоимости исследование проводится редко.
Применение других способов исследования мокроты в настоящее время ограничено.
Читайте также:
Интерпретация результатов
Срок проведения анализа зависит от метода диагностики. Посев мокроты на питательные среды делается в течение 3-х месяцев. Первые колонии могут появляться на 3—6 неделе. Отдельные типы микобактерий могут не давать роста на протяжении 90 дней. При отсутствии роста БК на питательных средах результат считают отрицательным.
Расшифровка бактериоскопического анализа мокроты делается в течение одного дня. Наличие в мазке БК говорит о прогрессирующей форме туберкулеза. Отсутствие КУМ в мокроте свидетельствует об отсутствии заболевания или о недостаточном количестве возбудителя. Следовательно, отрицательный результат микроскопии не исключает наличия туберкулеза.
Проблемой данных способов обследования является большая доля ложноположительных результатов, требующих дальнейшего уточнения.
Ценность исследования
Информативная ценность исследования различна для каждого из способов. Методы экспресс-диагностики (ИФА, ПЦР) обладают короткими сроками проведения и высокой чувствительностью. Однако, ввиду недостаточной специфичности, значительное количество результатов являются ложноположительными. Их доля у лиц с нетуберкулезными заболеваниями доходит до 14%.
Ошибочные данные ИФА объясняются схожими антигенами БК и непатогенных микобактерий. Проблема недостоверных результатов ПЦР объясняется контаминацией (смешением) образцов микрофлоры во время забора и транспортировки. По данным некоторых авторов, доля ошибочных заключений может доходить до 50%.
При микроскопии мокроты или проведении посева на БК ложноположительные результаты встречаются крайне редко. Чаще всего это связано с неправильной интерпретацией данных.
Полезное видео
Подробное видео о лабораторной диагностике мокроты при туберкулезе:
Заключение
Сдача мокроты на БК является обязательным этапом диагностики туберкулеза. Анализ позволяет не только выявить заболевание, но и подобрать эффективную схему лечения. Также исследование помогает осуществить динамическое наблюдение в процессе лечения. Для получения достоверных данных важно определить цель исследования и выбрать метод, который будет максимально информативным в этом случае.
Читайте также:
