Пцр-диагностика туберкулеза у детей

ПЦР на туберкулёз назначают, когда невозможно поставить диагноз или нельзя провести иные исследования. Анализ даёт возможность выявить палочку Коха на самых ранних стадиях и своевременно начать лечение.

Описание ПЦР на туберкулёз

Показания для ПЦР диагностики

Виды анализов ПЦР на туберкулёз

Подготовка к сдаче анализа

Как проводится ПЦР на туберкулёз

Расшифровка результатов обследования

Особенности ПЦР на туберкулёз у детей

Сколько стоит ПЦР на туберкулёз?

Комментарии и Отзывы

Описание ПЦР на туберкулёз

ПЦР (полимеразная цепная реакция) на туберкулёз – это точный анализ, способный выявить палочку Коха за несколько часов. Диагностика основана на методах генной инженерии. Врачи выделяют клетку ДНК, при помощи генно-молекулярных тестов определяют тип возбудителей.

• позволяет выявить возбудителя на ранних стадиях, без проявления видимых симптомов;
• диагностика не имеет противопоказаний и разрешена детям;
• исследование можно проводить при взятии минимального количества материала.
• универсальность исследования биоматериалов;
• исследование эффективно при определении рецидива болезни.

Наряду с достоинствами, у ПЦР исследования имеются и недостатки.

Основные из них:

1. Исследование не везде можно сдать. Поскольку оборудование для такой диагностики дорогостоящее, его устанавливают в платных лабораториях.
2. ПЦР на туберкулёз может дать положительный ответ, если обнаружит убитые микобактерии, к примеру, после проведённого лечения.
3. Мутации возбудителей болезни значительно снижают эффективность метода ПЦР, поскольку нити ДНК неспособны последовательно синтезироваться.
4. Необходимость тщательно выбирать биоматериал для анализа.

Показания для ПЦР диагностики

Направляют на обследование по следующим показаниям:

1. Если был хотя бы единичный контакт с больным туберкулёзом и выявить заболевание с помощью стандартных анализов сложно.
2. Бывают ситуации, когда нет возможности привести человека для рентгена или других исследований. В таких случаях гораздо проще доставить мокроту.
3. Анализ назначается накануне предстоящей операции, когда необходимо определить, болен человек или нет.
4. Если у пациента сомнительный результат реакции Манту.
5. Назначают беременным и детям, чтобы избежать облучения от рентгена.

Виды анализов ПЦР на туберкулёз

Выбор биоматериала для обследования на туберкулёз должен назначаться в индивидуальном порядке.

Для диагностики ПЦР на туберкулёз могут взять анализы:

Особенности анализа крови на туберкулёз:

1. Проводят в тех случаях, когда другие диагностики не подходят или противопоказаны. Например, для постановки верного диагноза требуется делать не один рентген-снимок. Для организма излишнее облучение небезопасно, поэтому взять кровь у пациента гораздо проще.
2. Также врач может дать направление на кровь при получении спорных результатов после флюорографии.

1. Анализ слюны менее популярен и информативен, чем другие исследования, так как туберкулёз не поражает слюнные железы. Поэтому в большинстве случаев результат будет отрицательным.
2. Метод направлен на выявление лёгочных и внелёгочных форм.
3. Если под действием реагента цвет образца не меняется, это означает, что возбудителей нет. Если все же возникает подозрение на болезнь, то проводится дополнительный комплекс анализов.

Анализ мокроты является наиболее информативным для выявления возбудителей туберкулёза. Пробы берут несколько раз, как правило, трёх раз достаточно. Это исключает возможность ошибок при получении некачественного материала.

Если человек заражён туберкулёзом, то вместе с кашлем будет выделяться мокрота в небольших количествах. У больных в запущенной стадии заболевания слизь будет выделяться с кровянистыми вкраплениями.

Не рекомендуется брать мокроту для обследования, если у пациента подозрения на туберкулёз костей или нервной системы.

Анализ мочи – это один из способов выявления внелёгочных форм заболевания: туберкулёз почек и мочеполовой системы.

При лёгочной форме заболевания общий анализ мочи практически неинформативен, так как не наблюдается ярко выраженных патологических изменений.

Из видео вы узнаете какой врач ставит диагноз туберкулёз. Снято каналом tuberculum. ru.

Подготовка к сдаче анализа

При сдаче анализа крови ПЦР стоит придерживаться некоторых правил для получения достоверного результата:

• рекомендуется сдавать анализ натощак;
• следует исключить алкоголь накануне обследования;
• нужно закончить приём антибиотиков за 15–20 дней до анализа;
• рекомендуется воздержаться от курения за час до забора крови.

При сдаче мокроты для обследования также рекомендуется следовать некоторым правилам:

• материал собирают утром, поэтому предварительно чистят зубы и тщательно полоскают ротовую полость;
• если мокрота плохо отходит, то рекомендуется вечером принять отхаркивающее средство или сделать ингаляцию;
• необходимо прекратить приём антибиотиков за 15 дней до обследования.

Для получения достоверного результата анализа мочи, пациенту рекомендуется придерживаться следующих правил:

• материал необходимо собирать с утра;
• накануне не рекомендуется употреблять в пищу продукты, которые способны изменить цвет жидкости (свёклу, чернику и другие);
• прекратить приём антибиотиков за 15 дней до обследования.

Как проводится ПЦР на туберкулёз

Особенности забора материала:

1. Анализ крови обязательно берётся у пациента утром из вены в лаборатории.
2. Для сдачи мокроты на слизь нужна обязательно из гортани и желательно без большого количества слюны. Её пациент должен сплюнуть в специальный стерильный контейнер, после чего сдать на исследование.
3. Врачи берут соскоб специальным инструментом со слизистой щеки.
4. Моча сдаётся в специальном контейнере. Берётся средняя часть утренней порции.

Молекулярно генетическая реакция посредством ПЦР проводится с помощью специального прибора, который называется амплификатор. Для изучения необходимы сегменты ДНК, с которых начинается синтез молекул.

Методика состоит из четырёх этапов:

1. Изначально собирается необходимый биоматериал для исследования (кровь, мокрота и слюна).
2. Затем образец прогревается при температуре до 98 градусов и не более двух минут. Таким образом, разрушается первичная форма генетики ДНК и образуются две цепочки.
3. Далее идёт отжиг или понижение температуры, за счёт чего праймер связывается с нитью ДНК.
4. Последний этап носит название элонгация. Это синтез молекул, который приводит к конечному результату.

Необходимо провести 25–30 подобных циклов, чтобы получить определённое количество копий ДНК вирусов. По ним и определяются возбудители заболевания.

Информативность и достоверность ПЦР диагностики составляет 100%.

Расшифровка результатов обследования

Сроки изготовления анализа составляют порядка 5–6 часов.

Диагностика методом ПЦР даёт 2 варианта результатов:

1. Обнаружено. В материале, который исследовали, были выявлены ДНК туберкулёзного агента. Вероятность заражения составляет 97%. Таких пациентов быстро направляют в противотуберкулёзный диспансер, где и будет проводиться лечение.
2. Не обнаружено. Отрицательный ответ свидетельствует об отсутствии возбудителя заболевания.

При положительном результате врачом проводится развёрнутая расшифровка, которая определяет стадию и очаг болезни.

Фотогалерея

Особенности ПЦР на туберкулёз у детей

ПЦР назначают, если сомнителен результат пробы Манту или при малейшем подозрении на заражение. Провежение процедуры безапасно для детей.

Сколько стоит ПЦР на туберкулёз?

Видео

Из видео узнаете что такое ПЦР и каким образом её проводят. Снято каналом СТС.

Полимеразно-цепная реакция (ПЦР) представляет собой современный и эффективный метод диагностики многих заболеваний, в том числе и туберкулеза. Такая процедура позволяет достаточно быстро определить возбудителей различных заболеваний. В итоге ПЦР на туберкулез помогает пациенту и его лечащему врачу своевременно начать терапию выявленной патологии.

• Как проводится сама ПЦР-диагностика
• К кому обратиться за проведением анализа?
• Кому проводится?
• Основные минусы

Методика исследования

ПЦР-диагностика туберкулеза потребует предварительного забора материала. В качестве него подойдут следующие биологические жидкости:

• кровь,
• моча,
• кал,
• мокрота,
• соскоб с любых органов,
• выделения половых органов,
• спинномозговая жидкость.

При этом от того, какой именно материал был взят для исследования, будет зависеть достоверность полученного результата. Чаще всего такой анализ на туберкулез предполагает забор крови, мочи или мокроты у пациента. При этом наиболее достоверный результат можно получить в тех случаях, когда в качестве материала выступает мокрота.

Что касается крови и мочи пациента, то, несмотря на достаточно высокую частоту использования именно таких материалов, эффективность и актуальность выявления микобактерии туберкулеза данным способом является сомнительной.

Дело в том, что в таких биологических средах инфекция данного типа появляется либо при сепсисе, либо при диссеминированном туберкулезе. При локальных формах, которые встречаются значительно чаще в анализе крови и мочи могут отсутствовать какие бы то ни было изменения.

Для проведения подобного метода исследования необходимо сначала взять тот или иной материал. После этого он попадает в специальную камеру, называемую амплификатором. Названа она таким образом по той причине, что именно здесь происходит удвоение цепи ДНК, позволяющее в дальнейшем вынести положительный или отрицательный результат.

В амплификаторе находятся все необходимые ферменты для того, чтобы обеспечить возможность удвоения молекул ДНК. В дальнейшем оценивается их количество. Таким методом устанавливается факт наличия или отсутствия возбудителя туберкулеза.

Современные аппараты не только выполняют полимеразную цепную реакцию, но также и выдают результаты проведенного обследования. В дальнейшем их расшифровкой занимается врач-фтизиатр. Пациент должен прийти к данному специалисту с выпиской, в которой указаны результаты проведенного исследования.

При этом доктор пользуется следующей системой оценки:

• менее 0,9 относительных единиц говорят об отрицательном результате,
• от 0,9 до 1,1 относительных единиц свидетельствуют о сомнительном результате,
• более 1,1 относительных единиц говорят о положительном результате исследования, то есть о наличии туберкулеза.

В результате доктор получает возможность достаточно легко определить наличие или отсутствие возбудителя заболевания в исследуемом материале.

В настоящее время есть сразу несколько специалистов, которые могут назначать подобный вариант исследования.

Основными среди них являются следующие врачи:

Несмотря на то, что назначить ПЦР для диагностики туберкулеза может каждый из этих специалистов, однако оценить результаты такого анализа и установить окончательный диагноз может только врач-фтизиатр.

Помимо этого, он назначит необходимый курс лечения, установит, где именно он должен проходить (на дому или в специализированном стационаре), а также предоставит пациенту все необходимые рекомендации по изменению образа жизни.

Преимущества и недостатки методики

ПЦР-анализ на туберкулез обладает целым рядом плюсов, которые привлекают, как пациентов, так и врачей-специалистов. Основными среди них являются следующие:

1. Анализ обеспечивает практически 100% выявление возбудителя заболевания в собранном биологическом материале. Для того чтобы аппарат выдал положительный результат, достаточно наличие всего 10-100 клеток микобактерии туберкулеза.
2. Результат после того, как выполнен анализ крови или мокроты, будет готов уже спустя 4-5 ч. Другие методики определения наличия микобактерии туберкулеза в биологических средах могут потребовать ожидания от нескольких недель до 1 месяца.
3. Низкий риск ложного результата. Это обусловлено достаточно высокой специфичностью ДНК, которой обладает возбудитель туберкулеза.
4. Появляется возможность выявить ДНК микобактерии при туберкулезе легких. При помощи прочих лабораторных методов исследования добиться подобных результатов практически невозможно.

Еще одним огромным преимуществом, которое предоставляет именно такой диагностический процесс, является возможность определения устойчивости бактерий к тем или иным антибиотиками. В результате, подобный анализ крови или мокроты позволяет установить, к каким именно медикаментозным препаратам наиболее чувствительна микобактерия туберкулеза.

В конечном итоге, можно достаточно быстро не только установить сам факт наличия заболевания, но также и назначить максимально эффективный курс лечения. Результатом станет значительно меньшее количество осложнений у пациентов.

При этом такой вариант исследования позволяет установить подобную устойчивость всего-навсего за 2 дня. Прочие варианты обследования не предоставляют таких же возможностей. Срок установления восприимчивости к определенным антибактериальным лекарственным средствам, если берется обычный анализ крови, может достигать 1 месяца.

ПЦР туберкулеза хорош еще и тем, что может проводиться у следующих групп пациентов:

• У детей,
• У пациентов с иммунодефицитом.

Диагностика туберкулеза у детей при помощи данного метода исследования используется достаточно часто. При этом намного чаще для этих целей проводится именно анализ крови, а не мокроты. Это обусловлено тем, что далеко не всегда ребенок, особенно маленький, способен в точности выполнить указания специалиста для того, чтобы получить достаточное количество мокроты из дыхательной системы.

При острой необходимости для получения подобного биологического материала можно провести бронхоскопию. Ребенок, как, впрочем, и взрослый, достаточно тяжело переносит подобный вариант исследования, поэтому его проводят только в исключительных случаях.

Для пациентов с иммунодефицитом подобный вариант исследования является основным методом исследования. Это обусловлено тем, что ИФА-диагностика для данной группы лиц является малоинформативной.

Связано такое положение с тем, что у них значительно уменьшена выраженность иммунного ответа на проникновение инфекции. Кровь подобных пациентов содержит сравнительно небольшое количество антител. Кроме этого, детям с ослабленным иммунитетом не рекомендуется проводить обследование с использованием реакции Манту. ПЦР-диагностика для них становится отличным выходом из сложной ситуации.

Помимо несомненных преимуществ, у подобного метода исследования имеются и свои недостатки. Основными среди них являются следующие:

• если кровь не содержит ДНК микобактерии туберкулезис, то это абсолютно не свидетельствует об отсутствии заболевания,
• при локальных формах туберкулеза при помощи полимеразной цепной реакции установить наличие ДНК в любых биологических средах обычно не удается,
• на ранних стадиях болезни ДНК микобактерии туберкулезис в различных биологических средах обычно отсутствуют.

В результате, применимым данное исследование может быть для лиц с иммунодефицитом или же в случаях с пациентами, которые находятся в тяжелом состоянии. Кроме этого, особенно ценной полимеразно-цепная реакция становится в диагностике туберкулеза легких для детей, которым противопоказаны другие методы диагностики. В остальных случаях его проведение обязательно должно дополняться другими методами.

Одним их эффективных диагностических методов является метод ПЦР на туберкулез (полимеразная цепная реакция). Анализ представляет собой метод обнаружения возбудителя при помощи ДНК и РНК в организме человека. Анализ высокочастотный, поэтому позволяет выявить микроорганизмы, которые являются возбудителями болезни, даже если они находятся в малом количестве. Для этого достаточно наличия единичного клеточного элемента. Анализ проводится при помощи полимеразы, специфического фермента.

В каких случаях необходим ПЦР

Туберкулез – распространенное заболевание инфекционного происхождения, возбудитель которого – палочка Коха. К основным симптомам патологии относится кашель с выделением мокроты в течение длительного периода, кровохарканье, которое присоединяется на более поздних стадиях болезни, повышенная температура тела, постоянная слабость, потливость в ночное время, резкое похудение.

Туберкулез может поражать не только легкие, но и головной мозг, систему пищеварения, суставы, позвоночник, кожные покровы, мочеполовую систему. Болеют как взрослые, так и дети. Каждый год заболевают около 10 млн человек, из которых около 2 млн погибают. Патология передается воздушно-капельным путем, через органы пищеварения, быстро образует устойчивость ко многим медикаментозным средствам.

Важным моментом в лечении инфекции является вовремя обнаруженная болезнь.

Метод ПЦР для выявления туберкулеза полностью безопасный и применяется без ограничений. Проводится по направлению от фтизиатра, педиатра, терапевта или пульмонолога. В некоторых ситуациях ПЦР является единственным диагностическим методом, часто назначается:

• при беременности, т.к. во время вынашивания ребенка рентгенологическое и флюорографическое исследования противопоказаны;
• при контакте с источником инфекции;
• при аллергической реакции;
• при ВИЧ-инфекции;
• при затрудненной постановке диагноза в случае болезней легких;
• при обследовании перед проведением оперативных вмешательств;
• в детском возрасте.

Другие методы также продолжают применяться в случаях, когда нет возможности провести ПЦР, – это туберкулинодиагностика или Манту, флюорографическое исследование, рентгенография легких. Данные обследования бесплатные, в отличие от ПЦР, но имеют свои недостатки.

ПЦР диагностика туберкулеза у детей – менее вредная процедура, чем рентген, при котором ребенок получит лишнюю и не нужную дозу облучения. Тест на туберкулез может вызвать проявление аллергической реакции у ребенка. Бактериологический анализ долго исследуется, результата можно ждать только через месяц. Поэтому при возможности проведения ПЦР ребенку лучше использовать его.

Противопоказаний для данного вида диагностики практически нет, можно использовать при простудных и других заболеваниях. Не рекомендуется проводить исследование сразу после прививки и курса противотуберкулезной терапии, т.к. остаточные микроорганизмы могут находиться некоторое время в крови и влияют на диагностику туберкулеза.

Преимущества и недостатки анализа

Диагностика туберкулеза данным методом – распространенная процедура, она имеет ряд преимуществ:

• Высокая точность исследования, позволяющая высеять микобактерии в малых количествах.
• Выявляет заболевание на самых ранних стадиях, еще до возникновения симптоматики.
• С помощью этого метода получается с первого раза выявить возбудителя.
• Все исследование (с получением результата) занимает не более 5 часов. При этом посев необходимо ждать несколько недель. Это особенно важно перед проведением оперативных вмешательств, в случае необходимости быстрой диагностики на наличие заболевания.
• Метод эффективен при диагностике рецидива заболевания.
• Для исследования применяется жидкий биологический материал.
• Для проведения диагностики туберкулеза в легких более достоверную диагностическую информацию дает мокрота, при менингите туберкулезного происхождения исследуются участки спинного мозга.
• Кровь помогает обнаружить местный очаг инфицирования, проверить степень чувствительности возбудителя к антибактериальной терапии, а при помощи этого назначается эффективное и правильное лечение.
• Может использоваться вместо флюорографического и рентгенологического исследований, которые запрещены для проведения детям младшего возраста. При необходимости можно назначать исследование ПЦР на туберкулез вместо Манту.

• Главный – это достаточно высокая цена, поскольку для проведения исследования применяется дорогое современное оборудование. За счет этого в основном используется как метод дополнительной диагностики наряду с другими исследованиями.
• Невозможность провести ПЦР сразу после курса лечения из за остаточных бактерий.
• В некоторых случаях в результате мутирования бактерий – возбудителей заболевания – результат анализа может быть ложноположительным.

Виды анализа

Выбор того или иного биологического материала на исследование туберкулеза назначается индивидуально, это может быть кровь, мазок слюны, мокрота, моча.

Анализ крови на туберкулез назначают в случае невозможности проведения других исследований. Кроме того, он более безвреден для тех людей, которым рентгенографическое обследование способно принести вред. Для того чтобы увидеть полную картину, иногда требуется сделать несколько снимков, а это лишнее облучение организма. Кровь может исследоваться и при получении сомнительных результатов флюорографии.

Анализ ПЦР на туберкулез слюны не такой информативный, как исследование крови, потому что туберкулезная инфекция не действует на слюнные железы. В результате ответ почти всегда отрицательный.

Туберкулез — не приговор! Наша постоянная читательница порекомендовала действенный метод! Новое открытие! Ученые выявили лучшее средство, которое моментально избавит вас от туберкулеза. 5 лет исследований. Самостоятельное лечение в домашних условиях! Тщательно ознакомившись с ним, мы решили предложить его и вашему вниманию. Читать далее >>

Анализ мокроты на туберкулез берется на исследование 3 раза во избежание неточного результата. При начальной стадии инфицирования мокрота будет выделяться в малом количестве, при запущенной патологии будут присутствовать кровянистые включения.

При подозрении на туберкулез костей или нервной системы данное исследование информативным не будет.

Анализ мочи помогает выявить туберкулез внелегочной формы – мочеполовых органов. При поражении легких данное исследование не информативно.

Сдача ПЦР мочи на туберкулез требует подготовки. Накануне процедуры нужно исключить прием лекарственных препаратов, сексуальные контакты. Брать материал следует в утренние часы, стараться за несколько дней до проведения процедуры не употреблять в пищу продукты, которые могут окрасить мочу в различные цвета.

Подготовка к процедуре

Во избежание получения ложного или не информативного результата рекомендовано придерживаться следующих правил:

• Перед ПЦР-анализом на туберкулез в течение 8 часов воздержаться от приема пищи.
• Не употреблять алкоголь и не курить в течение 6 часов перед процедурой.
• Перед исследованием не принимать лекарственные препараты.
• Мокроту собирать утром после чистки зубов и полоскания ротовой полости кипяченой водой.
• При небольшом количестве выделяемого экссудата накануне выпить препарат с отхаркивающим действием или провести ингаляцию. Наиболее информативная мокрота та, в которой присутствуют слизь, гной с белыми или желтоватыми вкраплениями.

При невозможности взятия мокроты на исследование применяют смыв из области бронхов, он не требует специальной подготовки. Проводится путем вливания пациенту в трахею раствора натрия хлорида, который провоцирует кашель с жидкостью. Она и используется для дальнейшего исследования.

Повлиять на точность результата могут некоторые лекарственные препараты, особенно антибиотики и гепарин. По этой причине за 3 дня до проведения процедуры следует исключить их применение.

Как производится забор крови

Процедура проходит с использованием амплификатора, исследование состоит из 4 этапов. Для анализа берутся участки ДНК, в которых начинается процесс синтезирования молекул, нуклеотидов, полимеразанов. Образцы прогреваются до температуры 98°С для того, чтобы разрушилась первичная структура ДНК-цепочки.

Затем праймер связывается с нитью ДНК при помощи отжига и снижения температуры на несколько градусов.

После 25-30 идентичных циклов образуется некоторое число копий ДНК вирусов, по которым уже и определяется возбудитель болезни. Этот анализ может заменять Манту ребенку. Результат исследования может быть положительным в течение некоторого времени, т. к. анализ ПЦР не идентифицирует мертвые микобактерии от живых.

Расшифровка результатов

• Обнаружено – в исследуемом материале нашли ДНК микобактерии туберкулеза. Возможность заражения – примерно 98%. При таком результате доктором проводится развернутая расшифровка анализа, которая определяет стадию протекания заболевания и ее очаговое расположение. Таких пациентов немедленно отправляют в противотуберкулезный диспансер для проведения лечения.
• Не обнаружено – возбудитель заболевания отсутствует.

Сколько стоит анализ

Анализ крови ПЦР на туберкулез стоит от 240 до 365 руб., цена зависит от города. Самый дорогостоящий анализ в Москве, в остальных регионах цена на исследование примерно одинаковая.